Burkitts人淋巴瘤細胞系
Burkitts人淋巴瘤細胞系核心產(chǎn)品為從Burkitt淋巴瘤患者新鮮腫瘤組織中分離、永生化構(gòu)建的穩(wěn)定細胞株,可提供不同亞型(如EB病毒陽性、EB病毒陰性)的細胞系,配套提供細胞培養(yǎng)說明書、細胞凍存液、復蘇液及質(zhì)量檢測報告(含細胞純度、c-Myc基因表達檢測、支原體檢測、EB病毒感染狀態(tài)鑒定等),同時提供細胞培養(yǎng)技術(shù)支持及定制化實驗服務(wù)。該細胞采用密度梯度離心、免疫磁珠分選等成熟分離技術(shù),從腫瘤組織中去除正常淋巴細胞、紅細胞等雜細胞,通過淋巴瘤特異性標志物(如CD19、CD20、CD22)及c-Myc基因表達鑒定,確保細胞純度≥98%,無支原體、細菌、真菌污染,細胞活性≥90%。該細胞適配常規(guī)懸浮細胞培養(yǎng)條件,可穩(wěn)定傳代,生物學特性穩(wěn)定,保留其惡性增殖、c-Myc基因異常表達及EB病毒感染相關(guān)特性(EB陽性亞型),廣泛應(yīng)用于Burkitt淋巴瘤發(fā)病機制研究、c-Myc基因功能驗證、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移研究、靶向藥物篩選及免yi治療相關(guān)實驗等科研場景,為腫瘤學、分子生物學、免疫學等相關(guān)領(lǐng)域的科研探索、藥物研發(fā)提供核心細胞模型,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實驗室及各級醫(yī)院腫瘤科、血液科科研部門。
分離與培養(yǎng)原理
該細胞的分離與培養(yǎng)核心基于腫瘤組織消化分離及永生化技術(shù),結(jié)合Burkitts人淋巴瘤細胞懸浮生長、惡性增殖的生物學特性,實現(xiàn)細胞的精準分離與體外穩(wěn)定培養(yǎng),具體核心步驟分為分離和培養(yǎng)兩部分:一是細胞分離原理,選取Burkitt淋巴瘤患者新鮮腫瘤組織,無菌操作下剪碎至勻漿狀態(tài),加入膠原酶、yi蛋白酶混合消化液,37℃水浴消化20-30分鐘,終止消化后用PBS漂洗2-3次,800r/min離心5分鐘棄去上清液,通過密度梯度離心(Percoll梯度)分離獲得單個核細胞,再利用免疫磁珠分選技術(shù)(針對CD19、CD20標志物)篩選出純的淋巴瘤細胞,去除雜細胞污染,獲得高純度該細胞;二是細胞培養(yǎng)原理,將分離獲得的該細胞接種于培養(yǎng)瓶中,使用含10%-15%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基,添加青mei素、鏈mei素雙抗,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)基可維持細胞的惡性增殖活力,同時保留其c-Myc基因異常表達及EB病毒感染特性(EB陽性亞型),定期更換培養(yǎng)基(每1-2天一次),待細胞密度達到1×10?-1×10? cells/mL時進行傳代,確保細胞正常生長,避免細胞密度過高導致凋亡。此外,所有分離培養(yǎng)的該細胞均需經(jīng)過細胞活性檢測、純度鑒定、c-Myc基因檢測及污染檢測,確保細胞的穩(wěn)定性和可靠性,為后續(xù)科研實驗提供優(yōu)質(zhì)細胞模型,同時可通過優(yōu)化培養(yǎng)體系,模擬體內(nèi)淋巴瘤微環(huán)境,提升細胞體外培養(yǎng)的穩(wěn)定性。
產(chǎn)品特點
該細胞以“純度高、活性強、特征典型、適配性廣"為核心,貼合Burkitt淋巴瘤相關(guān)研究的實際科研需求,核心特點突出,匹配科研實驗對細胞模型的核心訴求。一是病理特征典型,保留Burkitt淋巴瘤的核心生物學特征,存在c-Myc基因異常擴增及易位,部分亞型攜帶EB病毒,可精準模擬臨床淋巴瘤的病理狀態(tài),助力發(fā)病機制研究;二是細胞純度高、無污染,細胞純度≥98%,經(jīng)淋巴瘤特異性標志物鑒定及嚴格污染檢測,無支原體、細菌、真菌及雜細胞污染,確保實驗結(jié)果的準確性;三是生物學特性穩(wěn)定,細胞生長狀態(tài)良好,懸浮增殖迅速,可穩(wěn)定傳代30代以上,傳代過程中c-Myc基因異常表達特性不丟失,惡性表型穩(wěn)定,符合科研實驗對數(shù)據(jù)可重復性的核心要求;四是功能關(guān)聯(lián)性強,具備惡性淋巴瘤細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移潛能,可用于研究c-Myc基因?qū)δ[瘤增殖、凋亡的調(diào)控機制,以及EB病毒與淋巴瘤發(fā)生的關(guān)聯(lián),適配多維度科研需求;五是適配性強,可適配體外常規(guī)懸浮細胞培養(yǎng)、MTT增殖實驗、Transwell侵襲/遷移實驗、Western blotting檢測、免疫熒光染色、基因轉(zhuǎn)染、流式細胞術(shù)等多種實驗場景,同時可用于裸鼠異種移植體內(nèi)實驗,助力體內(nèi)外協(xié)同研究;六是操作便捷,提供完整的細胞復蘇、培養(yǎng)、凍存說明書,細胞復蘇成活率高(≥90%),無需復雜實驗設(shè)備,常規(guī)懸浮細胞培養(yǎng)條件即可滿足生長需求,適配各類實驗室操作,同時提供基因表達驗證、細胞培養(yǎng)等專屬技術(shù)指導。
適用實驗場景
該細胞專為Burkitt淋巴瘤及相關(guān)腫瘤科研實驗設(shè)計,適配多種體外及體內(nèi)實驗場景,核心應(yīng)用包括:一是淋巴瘤發(fā)病機制研究,探究該細胞中c-Myc基因異常擴增、易位及EB病毒感染對淋巴瘤發(fā)生發(fā)展的調(diào)控機制,分析相關(guān)信號通路(如PI3K/Akt、NF-κB)的作用,為淋巴瘤發(fā)病機制研究提供支撐;二是c-Myc基因功能研究,通過該細胞開展c-Myc基因沉默、過表達實驗,探究其對細胞增殖、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移的影響,明確其在惡性淋巴瘤中的促癌作用;三是腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移研究,利用該細胞的侵襲性特性,開展Transwell、細胞劃痕等實驗,探究淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移的分子路徑,為抗轉(zhuǎn)移治療研究提供依據(jù);四是藥物篩選與藥效評估,將該細胞用于淋巴瘤靶向藥物(如c-Myc抑制劑、CD20單克隆抗體)、hua療藥物的篩選,評估藥物對細胞增殖、凋亡的抑制效果,為淋巴瘤藥物研發(fā)提供可靠的篩選模型;五是免yi治療相關(guān)研究,可用于CAR-T細胞治療、免疫檢查點抑制劑相關(guān)實驗,評估免yi治療對淋巴瘤細胞的殺傷效果,助力免yi治療技術(shù)研發(fā);六是分子機制驗證實驗,可用于Western blotting、Real-time PCR、流式細胞術(shù)等實驗,驗證淋巴瘤相關(guān)基因及信號通路的調(diào)控機制,為相關(guān)研究提供分子層面的數(shù)據(jù)支撐。該細胞適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實驗室及各級醫(yī)院腫瘤科、血液科科研部門,助力相關(guān)科研實驗的順利開展。
備注:(具體細胞分離、培養(yǎng)及實驗操作方法請參考產(chǎn)品說明書)
儲存與注意事項
儲存方面,該細胞凍存狀態(tài)下需置于-80℃超低溫冰箱或液氮中保存,有效期為12個月,凍存時需使用含5-10%DMSO的配套凍存液,采用梯度降溫法凍存(-1~-2℃/min降溫至-25℃以下,再以-5~-10℃/min降溫至-100℃后浸入液氮),避免細胞損傷;復蘇時需快速解凍(37℃水浴1-2分鐘),解凍后立即用70%酒精消毒凍存管,避免進水污染,復蘇后需立即接種至培養(yǎng)瓶,加入預熱的專用培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),復蘇后24小時內(nèi)避免離心或劇烈晃動,確保細胞適應(yīng)環(huán)境、恢復活力;常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)下,細胞需置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中,使用含10%-15%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng),定期更換培養(yǎng)基(每1-2天一次),維持細胞密度在1×10?-1×10? cells/mL,避免細胞密度過低或過高導致生長異常。注意事項包括:產(chǎn)品僅供科研使用,不用于臨床治療診斷;細胞復蘇時需快速解凍,避免反復凍融,解凍后及時接種,防止細胞活力下降,凍存管取出時需注意防護,避免凍傷;培養(yǎng)過程中需嚴格遵循無菌操作原則,禁止共用培養(yǎng)耗材,避免細胞污染,若發(fā)生污染切勿進行半量換液;細胞傳代時需輕輕吹打培養(yǎng)瓶,避免劇烈震蕩損傷細胞,傳代比例建議為1:2-1:3,確保細胞生長密度適宜;檢測過程中(如Western blotting、流式細胞術(shù)),需嚴格遵循實驗操作規(guī)范,確保c-Myc基因表達及相關(guān)分子檢測結(jié)果準確;過期細胞及污染細胞嚴禁使用,詳細安全信息請參照產(chǎn)品SDS文件;運輸過程中需采用干冰運輸,避免高溫、劇烈震蕩,確保細胞活力,運輸后需及時復蘇或轉(zhuǎn)移至對應(yīng)儲存環(huán)境。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準。