BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞
BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞核心產(chǎn)品為從BALB/c小鼠胚胎(通常為12-14天齡)中分離純化的原代細(xì)胞或永生化細(xì)胞株,可提供原代、傳代不同規(guī)格,配套提供細(xì)胞培養(yǎng)說明書、細(xì)胞凍存液、復(fù)蘇液及質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告(含細(xì)胞純度、活性檢測(cè)、支原體檢測(cè)、成纖維細(xì)胞標(biāo)志物鑒定等),同時(shí)提供細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)支持及定制化細(xì)胞處理服務(wù)。該細(xì)胞采用yi蛋白酶消化、差速貼壁、密度梯度離心等成熟分離技術(shù),從BALB/c小鼠胚胎組織中去除結(jié)締組織、紅細(xì)胞、上皮細(xì)胞等雜細(xì)胞,通過成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物(如波形蛋白Vimentin、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白α-SMA)鑒定,確保細(xì)胞純度≥98%,無支原體、細(xì)菌、真菌污染,細(xì)胞活性≥90%。該細(xì)胞適配常規(guī)原代細(xì)胞培養(yǎng)條件,可穩(wěn)定傳代,生物學(xué)特性穩(wěn)定,保留其增殖能力強(qiáng)、貼壁性好的固有功能,廣泛應(yīng)用于胚胎發(fā)育機(jī)制研究、胚胎干細(xì)胞飼養(yǎng)層制備、基因編輯模型構(gòu)建、腫瘤誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)及藥物篩選等科研場(chǎng)景,為發(fā)育生物學(xué)、分子生物學(xué)、腫瘤學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的科研探索、藥物研發(fā)提供核心細(xì)胞模型,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及各級(jí)醫(yī)院科研部門。
分離與培養(yǎng)原理
該細(xì)胞的分離與培養(yǎng)核心基于胚胎組織消化分離技術(shù),結(jié)合BALB/c小鼠胚成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性(貼壁生長(zhǎng)、增殖迅速),實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的精準(zhǔn)分離與體外穩(wěn)定培養(yǎng),具體核心步驟分為分離和培養(yǎng)兩部分:一是細(xì)胞分離原理,選取12-14天齡健康BALB/c小鼠胚胎,無菌操作下取出胚胎組織,去除頭部、四肢、內(nèi)臟及血管組織,碎至1mm3大小的組織塊,加入0.25%yi蛋白酶-EDTA消化液,37℃水浴消化30-40分鐘,期間每5-10分鐘搖動(dòng)一次,消化完成后加入含胎牛血清的培養(yǎng)基終止消化,用Hanks液漂洗2-3次,800r/min離心5分鐘棄去上清液,再通過差速貼壁法(貼壁1-2小時(shí))去除雜細(xì)胞,利用成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物篩選,獲得高純度該細(xì)胞,確保細(xì)胞無雜細(xì)胞污染;二是細(xì)胞培養(yǎng)原理,將分離獲得的該細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶中,使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)基可維持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,同時(shí)保留其貼壁增殖、分泌細(xì)胞外基質(zhì)的固有功能,定期更換培養(yǎng)基(每2-3天一次),待細(xì)胞融合度達(dá)80%-90%時(shí)進(jìn)行傳代,確保細(xì)胞正常生長(zhǎng),避免細(xì)胞老化或凋亡。此外,所有分離培養(yǎng)的該細(xì)胞均需經(jīng)過細(xì)胞活性檢測(cè)、純度鑒定、標(biāo)志物檢測(cè)及污染檢測(cè),確保細(xì)胞的穩(wěn)定性和可靠性,為后續(xù)科研實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)質(zhì)細(xì)胞模型,同時(shí)可通過優(yōu)化培養(yǎng)體系,模擬體內(nèi)胚胎微環(huán)境,提升細(xì)胞體外培養(yǎng)的穩(wěn)定性。
產(chǎn)品特點(diǎn)
該細(xì)胞以“純度高、活性強(qiáng)、遺傳穩(wěn)定、適配性廣"為核心,貼合胚胎發(fā)育、飼養(yǎng)層制備、腫瘤相關(guān)研究的實(shí)際科研需求,核心特點(diǎn)突出,匹配科研實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞模型的核心訴求。一是遺傳背景均一,源自近交系BALB/c小鼠,基因純合度高達(dá)99%以上,個(gè)體差異小,可顯著提升實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可重復(fù)性與可比性,減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾;二是細(xì)胞純度高、無污染,細(xì)胞純度≥98%,經(jīng)特異性標(biāo)志物(Vimentin、α-SMA)鑒定及嚴(yán)格污染檢測(cè),無支原體、細(xì)菌、真菌及雜細(xì)胞污染,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;三是生物學(xué)特性穩(wěn)定,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,貼壁性強(qiáng)、增殖迅速,可穩(wěn)定傳代20代以上,傳代過程中保留成纖維細(xì)胞的固有特性,不易老化,符合科研實(shí)驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)可重復(fù)性的核心要求;四是功能關(guān)聯(lián)性強(qiáng),具備成纖維細(xì)胞的典型特征,可分泌細(xì)胞外基質(zhì)、支持胚胎干細(xì)胞生長(zhǎng),適配胚胎發(fā)育機(jī)制研究、飼養(yǎng)層細(xì)胞制備,同時(shí)可被致癌因子誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化,用于腫瘤發(fā)生機(jī)制研究;五是適配性強(qiáng),可適配體外常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)、MTT增殖實(shí)驗(yàn)、Western blotting檢測(cè)、免疫熒光染色、基因轉(zhuǎn)染、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)等多種實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,同時(shí)可用于裸鼠體內(nèi)移植實(shí)驗(yàn),助力體內(nèi)外協(xié)同研究;六是操作便捷,提供完整的細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、凍存說明書,細(xì)胞復(fù)蘇成活率高(≥90%),無需復(fù)雜實(shí)驗(yàn)設(shè)備,常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)條件即可滿足生長(zhǎng)需求,適配各類實(shí)驗(yàn)室操作,同時(shí)提供細(xì)胞分離、標(biāo)志物檢測(cè)等專屬技術(shù)指導(dǎo)。
適用實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景
該細(xì)胞專為胚胎發(fā)育、飼養(yǎng)層制備、腫瘤及藥物相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),適配多種體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,核心應(yīng)用包括:一是胚胎發(fā)育機(jī)制研究,利用該細(xì)胞探究胚胎發(fā)育過程中成纖維細(xì)胞的增殖、分化及功能調(diào)控,分析相關(guān)基因在胚胎組織發(fā)育中的作用,為發(fā)育生物學(xué)研究提供支撐;二是飼養(yǎng)層細(xì)胞制備,該細(xì)胞可作為胚胎干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)的飼養(yǎng)層,分泌營(yíng)養(yǎng)因子維持干細(xì)胞的未分化狀態(tài),助力干細(xì)胞相關(guān)研究;三是基因編輯與疾病模型構(gòu)建,采用CRISPR-Cas9等基因編輯技術(shù)對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行修飾,構(gòu)建基因敲除、敲入細(xì)胞模型,模擬遺傳疾病、腫瘤等病理狀態(tài),助力疾病機(jī)制研究;四是腫瘤相關(guān)研究,利用該細(xì)胞易被致癌因子誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的特性,構(gòu)建腫瘤細(xì)胞模型,探究腫瘤發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制,同時(shí)可用于腫瘤相關(guān)基因功能驗(yàn)證;五是藥物篩選與藥效評(píng)估,將該細(xì)胞用于胚胎毒性藥物、抗腫瘤藥物、抗炎藥物等的篩選,評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的影響,為藥物研發(fā)提供可靠的篩選模型;六是細(xì)胞生物學(xué)研究,可用于成纖維細(xì)胞增殖、分化、衰老機(jī)制研究,以及細(xì)胞外基質(zhì)合成與調(diào)控相關(guān)實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及各級(jí)醫(yī)院科研部門,助力相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)的順利開展。
備注:(具體細(xì)胞分離、培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)操作方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說明書)
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
儲(chǔ)存方面,該細(xì)胞凍存狀態(tài)下需置于-80℃超低溫冰箱或液氮中保存,有效期為12個(gè)月,凍存時(shí)需使用含5-10%DMSO的配套凍存液,采用梯度降溫法凍存(-1~-2℃/min降溫至-25℃以下,再以-5~-10℃/min降溫至-100℃后浸入液氮),避免細(xì)胞損傷;復(fù)蘇時(shí)需快速解凍(37℃水浴1-2分鐘),解凍后立即用70%酒精消毒凍存管,避免進(jìn)水污染,復(fù)蘇后需立即接種至培養(yǎng)瓶,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),復(fù)蘇后24小時(shí)內(nèi)避免更換培養(yǎng)基,確保細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境、穩(wěn)定貼壁;常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)下,細(xì)胞需置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中,使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),定期更換培養(yǎng)基(每2-3天一次),待細(xì)胞融合度達(dá)80%-90%時(shí)傳代,避免細(xì)胞過度融合導(dǎo)致老化。注意事項(xiàng)包括:產(chǎn)品僅供科研使用,不用于臨床治療診斷;細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需快速解凍,避免反復(fù)凍融,解凍后及時(shí)接種,防止細(xì)胞活力下降,凍存管取出時(shí)需注意防護(hù),避免凍傷;培養(yǎng)過程中需嚴(yán)格遵循無菌操作原則,禁止共用培養(yǎng)耗材,避免細(xì)胞污染,若發(fā)生污染切勿進(jìn)行半量換液;細(xì)胞傳代時(shí)需控制消化時(shí)間(3-5分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞貼壁能力下降,傳代比例建議為1:3-1:5,確保細(xì)胞生長(zhǎng)密度適宜;檢測(cè)過程中(如Western blotting、免疫熒光染色),需嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范,確保成纖維細(xì)胞標(biāo)志物及相關(guān)分子檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確;過期細(xì)胞及污染細(xì)胞嚴(yán)禁使用,詳細(xì)安全信息請(qǐng)參照產(chǎn)品SDS文件;運(yùn)輸過程中需采用干冰運(yùn)輸,避免高溫、劇烈震蕩,確保細(xì)胞活力,運(yùn)輸后需及時(shí)復(fù)蘇或轉(zhuǎn)移至對(duì)應(yīng)儲(chǔ)存環(huán)境。
訂購(gòu)信息
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以上信息僅供參考,具體請(qǐng)已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。