BALB/c 小鼠胚胎細(xì)胞
BALB/c 小鼠胚胎細(xì)胞核心產(chǎn)品為從BALB/c小鼠胚胎(通常為10-14天齡)中分離純化的原代細(xì)胞或永生化細(xì)胞株,可提供原代、傳代不同規(guī)格,配套提供細(xì)胞培養(yǎng)說明書、細(xì)胞凍存液、復(fù)蘇液及質(zhì)量檢測報告(含細(xì)胞純度、活性檢測、支原體檢測、胚胎細(xì)胞標(biāo)志物鑒定等),同時提供細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)支持及定制化細(xì)胞處理服務(wù)。該細(xì)胞采用yi蛋白酶消化、密度梯度離心等成熟分離技術(shù),從BALB/c小鼠胚胎組織中去除結(jié)締組織、紅細(xì)胞等雜細(xì)胞,通過胚胎細(xì)胞特異性標(biāo)志物(如SSEA-3、SSEA-4、Oct4、Nanog)鑒定,確保細(xì)胞純度≥98%,無支原體、細(xì)菌、真菌污染,細(xì)胞活性≥90%。該細(xì)胞適配常規(guī)原代細(xì)胞培養(yǎng)條件,可穩(wěn)定傳代,生物學(xué)特性穩(wěn)定,保留其增殖能力強(qiáng)、分化潛能高的固有功能,廣泛應(yīng)用于胚胎發(fā)育機(jī)制研究、基因編輯模型構(gòu)建、腫瘤誘導(dǎo)實驗、單克隆抗體制備相關(guān)研究及藥物篩選等科研場景,為發(fā)育生物學(xué)、分子生物學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的科研探索、藥物研發(fā)提供核心細(xì)胞模型,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實驗室及各級醫(yī)院科研部門。
分離與培養(yǎng)原理
該細(xì)胞的分離與培養(yǎng)核心基于胚胎組織消化分離技術(shù),結(jié)合BALB/c小鼠胚胎細(xì)胞的生物學(xué)特性,實現(xiàn)細(xì)胞的精準(zhǔn)分離與體外穩(wěn)定培養(yǎng),具體核心步驟分為分離和培養(yǎng)兩部分:一是細(xì)胞分離原理,選取10-14天齡健康BALB/c小鼠胚胎,無菌操作下取出胚胎組織,去除頭部、四肢及內(nèi)臟組織,碎至1mm3大小的組織塊,加入0.25%yi蛋白酶消化液,37℃水浴消化30-60分鐘,期間每5-10分鐘搖動一次,消化完成后用Hanks液漂洗2-3次,800r/min離心5分鐘棄去上清液,再通過密度梯度離心去除雜細(xì)胞,利用胚胎細(xì)胞特異性標(biāo)志物篩選,獲得高純度該細(xì)胞,確保細(xì)胞無雜細(xì)胞污染;二是細(xì)胞培養(yǎng)原理,將分離獲得的該細(xì)胞接種于鋪有基質(zhì)膠的培養(yǎng)瓶中,使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)基可維持細(xì)胞的生長活力,同時保留其增殖、分化潛能,定期更換培養(yǎng)基(每2-3天一次),確保細(xì)胞正常生長,避免細(xì)胞分化或凋亡。此外,所有分離培養(yǎng)的該細(xì)胞均需經(jīng)過細(xì)胞活性檢測、純度鑒定、標(biāo)志物檢測及污染檢測,確保細(xì)胞的穩(wěn)定性和可靠性,為后續(xù)科研實驗提供優(yōu)質(zhì)細(xì)胞模型,同時可通過優(yōu)化培養(yǎng)體系,模擬體內(nèi)胚胎微環(huán)境,提升細(xì)胞體外培養(yǎng)的穩(wěn)定性。
產(chǎn)品特點
該細(xì)胞以“純度高、活性強(qiáng)、遺傳穩(wěn)定、適配性廣"為核心,貼合胚胎發(fā)育、基因編輯、免疫相關(guān)研究的實際科研需求,核心特點突出,匹配科研實驗對細(xì)胞模型的核心訴求。一是遺傳背景均一,源自近交系BALB/c小鼠,基因純合度高達(dá)99%以上,個體差異小,可顯著提升實驗數(shù)據(jù)的可重復(fù)性與可比性,減少個體差異對實驗結(jié)果的干擾;二是細(xì)胞純度高、無污染,細(xì)胞純度≥98%,經(jīng)特異性標(biāo)志物鑒定及嚴(yán)格污染檢測,無支原體、細(xì)菌、真菌及雜細(xì)胞污染,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性;三是生物學(xué)特性穩(wěn)定,細(xì)胞生長狀態(tài)良好,增殖能力強(qiáng),可穩(wěn)定傳代,傳代過程中保留胚胎細(xì)胞的分化潛能及固有特性,符合科研實驗對數(shù)據(jù)可重復(fù)性的核心要求;四是功能關(guān)聯(lián)性強(qiáng),具備胚胎細(xì)胞的典型特征,可分化為多種細(xì)胞類型,適配胚胎發(fā)育機(jī)制研究、基因編輯模型構(gòu)建,同時依托BALB/c小鼠的免疫特性,可用于免疫相關(guān)實驗及單克隆抗體制備相關(guān)研究;五是適配性強(qiáng),可適配體外常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)、MTT增殖實驗、Western blotting檢測、免疫熒光染色、基因轉(zhuǎn)染、擬胚體形成實驗等多種實驗場景,同時可用于裸鼠體內(nèi)移植實驗,助力體內(nèi)外協(xié)同研究;六是操作便捷,提供完整的細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、凍存說明書,細(xì)胞復(fù)蘇成活率高(≥90%),無需復(fù)雜實驗設(shè)備,常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)條件即可滿足生長需求,適配各類實驗室操作,同時提供細(xì)胞分離、標(biāo)志物檢測等專屬技術(shù)指導(dǎo)。
適用實驗場景
該細(xì)胞專為胚胎發(fā)育、基因編輯、腫瘤及免疫相關(guān)科研實驗設(shè)計,適配多種體外及體內(nèi)實驗場景,核心應(yīng)用包括:一是胚胎發(fā)育機(jī)制研究,利用該細(xì)胞的分化潛能,探究胚胎發(fā)育過程中細(xì)胞增殖、分化的調(diào)控機(jī)制,分析相關(guān)基因(如Oct4、Nanog)在胚胎發(fā)育中的作用,為發(fā)育生物學(xué)研究提供支撐;二是基因編輯與疾病模型構(gòu)建,采用CRISPR-Cas9等基因編輯技術(shù)對該細(xì)胞進(jìn)行修飾,構(gòu)建基因敲除、敲入細(xì)胞模型,模擬遺傳疾病、腫瘤等病理狀態(tài),助力疾病機(jī)制研究;三是腫瘤相關(guān)研究,利用該細(xì)胞易被致癌因子誘導(dǎo)的特性,構(gòu)建腫瘤細(xì)胞模型,探究腫瘤發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制,同時可用于腫瘤相關(guān)基因功能驗證;四是免疫與感染研究,依托BALB/c小鼠的免疫特性,將該細(xì)胞用于免疫細(xì)胞活化、細(xì)胞因子分泌相關(guān)實驗,或構(gòu)建流感病毒、肺炎鏈球菌等病原體感染模型,為疫苗研發(fā)、抗菌藥物篩選提供平臺;五是藥物篩選與藥效評估,將該細(xì)胞用于胚胎毒性藥物、抗腫瘤藥物、免疫調(diào)節(jié)劑等的篩選,評估藥物對細(xì)胞增殖、分化、凋亡的影響,為藥物研發(fā)提供可靠的篩選模型;六是單克隆抗體制備相關(guān)研究,利用BALB/c小鼠脾細(xì)胞與該細(xì)胞相關(guān)融合實驗,助力高親和力單克隆抗體的篩選與制備。該細(xì)胞適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實驗室及各級醫(yī)院科研部門,助力相關(guān)科研實驗的順利開展。
備注:(具體細(xì)胞分離、培養(yǎng)及實驗操作方法請參考產(chǎn)品說明書)
儲存與注意事項
儲存方面,該細(xì)胞凍存狀態(tài)下需置于-80℃超低溫冰箱或液氮中保存,有效期為12個月,凍存時需使用含5-10%DMSO的配套凍存液,采用梯度降溫法凍存(-1~-2℃/min降溫至-25℃以下,再以-5~-10℃/min降溫至-100℃后浸入液氮),避免細(xì)胞損傷;復(fù)蘇時需快速解凍(37℃水浴1-2分鐘),解凍后立即用70%酒精消毒凍存管,避免進(jìn)水污染,復(fù)蘇后需立即接種至鋪有基質(zhì)膠的培養(yǎng)瓶,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),復(fù)蘇后24小時內(nèi)避免更換培養(yǎng)基,確保細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境;常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)下,細(xì)胞需置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中,使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),定期更換培養(yǎng)基(每2-3天一次),確保細(xì)胞正常生長,避免細(xì)胞過度分化。注意事項包括:產(chǎn)品僅供科研使用,不用于臨床治療診斷;細(xì)胞復(fù)蘇時需快速解凍,避免反復(fù)凍融,解凍后及時接種,防止細(xì)胞活力下降,凍存管取出時需注意防護(hù),避免凍傷;培養(yǎng)過程中需嚴(yán)格遵循無菌操作原則,禁止共用培養(yǎng)耗材,避免細(xì)胞污染,若發(fā)生污染切勿進(jìn)行半量換液;細(xì)胞傳代時需控制消化時間,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷,傳代比例建議為1:3-1:5,確保細(xì)胞生長密度適宜;檢測過程中(如Western blotting、免疫熒光染色),需嚴(yán)格遵循實驗操作規(guī)范,確保胚胎細(xì)胞標(biāo)志物及相關(guān)分子檢測結(jié)果準(zhǔn)確;過期細(xì)胞及污染細(xì)胞嚴(yán)禁使用,詳細(xì)安全信息請參照產(chǎn)品SDS文件;運輸過程中需采用干冰運輸,避免高溫、劇烈震蕩,確保細(xì)胞活力,運輸后需及時復(fù)蘇或轉(zhuǎn)移至對應(yīng)儲存環(huán)境。
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。