SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞試劑盒，具有溫度敏感性永生化特性。33.5℃增殖，39.5℃分化并表達(dá)ALP。貼壁生長(zhǎng)，需G418篩選，廣泛用于成骨細(xì)胞分化及功能研究。

更新時(shí)間：2026-03-09

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SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞試劑盒

SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞試劑盒（SV40 Transfected Human Osteoblast Cell Kit），是基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測(cè)試劑盒，可特異性檢測(cè)相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)樣本中成骨細(xì)胞標(biāo)志物、成骨分化相關(guān)因子、礦化相關(guān)蛋白及信號(hào)通路相關(guān)分子的含量，也可用于該細(xì)胞培養(yǎng)過程中增殖活性監(jiān)測(cè)、成骨分化程度評(píng)估及藥物作用效果檢測(cè)，經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測(cè)試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn)，無交叉反應(yīng)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，無試劑降解、雜菌污染等問題。該細(xì)胞株是通過猿猴病毒40（SV40）轉(zhuǎn)染原代人成骨細(xì)胞獲得的永生化細(xì)胞株，保留人成骨細(xì)胞的典型特性，同時(shí)具備無限傳代能力，核心特性是表達(dá)成骨細(xì)胞特異性標(biāo)志物（如骨鈣素OCN、堿性磷酸酶ALP、骨橋蛋白OPN），可分泌成骨分化相關(guān)因子，參與骨形成、骨修復(fù)及礦化進(jìn)程調(diào)控，廣泛應(yīng)用于骨質(zhì)疏松發(fā)病機(jī)制研究、骨代謝疾病研究、促骨形成藥物篩選等領(lǐng)域，是評(píng)估成骨細(xì)胞功能、成骨分化程度及藥物干預(yù)效果的重要研究模型，可用于驗(yàn)證促骨形成藥物對(duì)成骨細(xì)胞增殖分化的促進(jìn)作用研究。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測(cè)快速，可精準(zhǔn)定量相關(guān)指標(biāo)含量，廣泛應(yīng)用于骨科科研、內(nèi)分泌學(xué)科研、藥物研發(fā)、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域，是臨床、科研領(lǐng)域的核心人成骨細(xì)胞相關(guān)檢測(cè)工具。

檢測(cè)原理

本試劑盒的核心檢測(cè)原理，基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），聚焦相關(guān)細(xì)胞檢測(cè)指標(biāo)（成骨細(xì)胞標(biāo)志物、成骨分化因子、礦化蛋白、信號(hào)通路分子等）的抗原抗體特異性結(jié)合特性，結(jié)合成骨細(xì)胞功能檢測(cè)的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì)：試劑盒預(yù)先將目標(biāo)檢測(cè)指標(biāo)（如OCN、ALP、OPN、成骨分化相關(guān)因子）特異性抗體包被于酶標(biāo)板上，加入待檢測(cè)樣本（相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液等）后，樣本中的目標(biāo)指標(biāo)會(huì)與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、成骨細(xì)胞碎片、無關(guān)細(xì)胞因子及其他骨組織相關(guān)蛋白后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗，與復(fù)合物特異性結(jié)合，形成“包被抗體-目標(biāo)指標(biāo)-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu)；再加入底物液（TMB），HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與樣本中目標(biāo)指標(biāo)的含量呈正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中目標(biāo)指標(biāo)的具體含量。檢測(cè)流程規(guī)范：樣本采集后需及時(shí)處理（相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清離心分離、細(xì)胞裂解液制備），按照試劑盒說明書稀釋樣本；酶標(biāo)板平衡至室溫后，依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對(duì)照，37℃孵育30分鐘；洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗，37℃孵育20分鐘；再次洗滌后加入底物液，37℃避光孵育15分鐘；加入終止液終止反應(yīng)，10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，計(jì)算檢測(cè)結(jié)果。

產(chǎn)品特點(diǎn)

本產(chǎn)品針對(duì)相關(guān)細(xì)胞指標(biāo)檢測(cè)需求優(yōu)化制備，核心特點(diǎn)如下：

1. 特異性強(qiáng)：采用高特異性目標(biāo)指標(biāo)（成骨細(xì)胞標(biāo)志物OCN、ALP、OPN、成骨分化因子等）單克隆抗體，可特異性結(jié)合樣本中的目標(biāo)分子，不與正常原代人成骨細(xì)胞雜蛋白、其他細(xì)胞系蛋白及無關(guān)因子發(fā)生交叉反應(yīng)，檢測(cè)特異性＞99%，確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)，有效規(guī)避成骨細(xì)胞相關(guān)檢測(cè)中的干擾因素，同時(shí)可有效區(qū)分成骨細(xì)胞特異性標(biāo)志物的假陽性與真實(shí)表達(dá)水平；

2. 質(zhì)控嚴(yán)格：每批次試劑盒均通過靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測(cè)，附完整QC報(bào)告，確保批內(nèi)變異系數(shù)（CV）＜8%、批間變異系數(shù)（CV）＜10%，檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.1ng/mL，符合科研標(biāo)準(zhǔn)，可精準(zhǔn)監(jiān)測(cè)相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)指標(biāo)的微量變化，助力藥物干預(yù)效果及成骨分化調(diào)控效果評(píng)估；

3. 操作便捷：試劑盒含全套檢測(cè)試劑（包被酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等），無需額外配制核心試劑，步驟簡(jiǎn)單，全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成，適配常規(guī)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室操作，新手易上手；

4. 樣本兼容廣：可適配相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞接種后動(dòng)物血清/骨組織勻漿等核心樣本類型，樣本用量少（僅需50μL/孔），無需復(fù)雜預(yù)處理，僅需簡(jiǎn)單離心、稀釋即可檢測(cè)，適配成骨細(xì)胞培養(yǎng)、藥物篩選、骨代謝機(jī)制研究等多場(chǎng)景樣本；

5. 適配場(chǎng)景廣：可用于相關(guān)細(xì)胞增殖活性監(jiān)測(cè)、成骨分化程度評(píng)估、成骨細(xì)胞標(biāo)志物及信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)檢測(cè)，骨質(zhì)疏松發(fā)病機(jī)制、骨代謝疾病發(fā)病機(jī)制研究，促骨形成藥物、抗骨質(zhì)疏松藥物的篩選與效果評(píng)估，以及骨科科研、內(nèi)分泌學(xué)科研、藥物研發(fā)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。

適用樣本類型

本試劑盒適配相關(guān)細(xì)胞樣本的體外檢測(cè)與科研實(shí)驗(yàn)，適用樣本類型明確：相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本（對(duì)數(shù)期細(xì)胞培養(yǎng)上清，離心去除細(xì)胞碎片）、細(xì)胞裂解液樣本（無菌收集細(xì)胞后裂解，離心取上清）、細(xì)胞接種后動(dòng)物血清樣本（靜脈采血，離心分離，避免溶血）、骨組織勻漿樣本（骨組織破碎后離心取上清）；實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景涵蓋相關(guān)細(xì)胞增殖、成骨分化程度監(jiān)測(cè)，成骨細(xì)胞標(biāo)志物及信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)檢測(cè)，骨質(zhì)疏松發(fā)病機(jī)制、骨代謝疾病發(fā)病機(jī)制研究，相關(guān)藥物篩選與效果評(píng)估，以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。推薦檢測(cè)體系：使用試劑盒配套酶標(biāo)板，酶標(biāo)儀（波長(zhǎng)450nm），按照說明書步驟操作；樣本稀釋比例為1:10（細(xì)胞裂解液、骨組織勻漿可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整），標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，參考區(qū)間為0.2~1.3ng/mL（具體以說明書為準(zhǔn)）。（具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說明書，該細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，培養(yǎng)需遵循貼壁細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)范，采用成骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基，接種密度不低于50萬個(gè)/mL，復(fù)蘇后需給予一定恢復(fù)期，定期觀察細(xì)胞形態(tài)、增殖狀態(tài)及成骨分化相關(guān)表型，避免密度過低導(dǎo)致不增殖，維持細(xì)胞貼壁狀態(tài)避免脫落影響檢測(cè)結(jié)果）

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存，嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置，避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開封后，密封冷藏保存，1個(gè)月內(nèi)用完，目標(biāo)指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融，防止其蛋白結(jié)構(gòu)破壞，底物液需避光保存；

3. 樣本采集后及時(shí)處理，相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液冷藏24小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)，動(dòng)物血清、骨組織勻漿冷藏或-20℃短期保存，48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)，避免樣本變質(zhì)、目標(biāo)指標(biāo)降解，細(xì)胞樣本需新鮮采集，避免細(xì)胞活力下降、成骨分化表型異常影響檢測(cè)結(jié)果；

4. 操作時(shí)嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范，佩戴防護(hù)用品，避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜；檢測(cè)過程中控制孵育溫度與時(shí)間，洗滌充分，避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差；

5. 底物液具有潛在刺激性，終止液為酸性溶液，操作時(shí)需謹(jǐn)慎，避免接觸衣物與皮膚，檢測(cè)完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板；

6. 相關(guān)細(xì)胞樣本需無菌采集與處理，細(xì)胞裂解液需充分裂解細(xì)胞，離心去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì)后再進(jìn)行檢測(cè)，避免雜質(zhì)干擾檢測(cè)結(jié)果；培養(yǎng)上清需在細(xì)胞對(duì)數(shù)期采集，避免細(xì)胞凋亡釋放的蛋白酶導(dǎo)致目標(biāo)指標(biāo)降解，同時(shí)避免培養(yǎng)體系中血清濃度過高影響檢測(cè)準(zhǔn)確性，藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)中需避免藥物本身干擾檢測(cè)結(jié)果，成骨分化誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中需注意樣本采集時(shí)機(jī)。