SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞（WI38/VA13）是人胚胎肺成纖維細(xì)胞經(jīng)SV-40病毒轉(zhuǎn)化的永生化細(xì)胞系。貼壁生長，常用于細(xì)胞永生化、病毒學(xué)及腫瘤轉(zhuǎn)化機(jī)制研究。

更新時間：2026-03-09

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SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞試劑盒

SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞試劑盒（SV-40 Transformed Lung Fibroblast Cell Kit），是基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測試劑盒，可特異性檢測相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)樣本中肺成纖維細(xì)胞標(biāo)志物、纖維化相關(guān)因子、增殖相關(guān)蛋白及信號通路相關(guān)分子的含量，也可用于該細(xì)胞培養(yǎng)過程中增殖活性監(jiān)測、纖維化程度評估及藥物作用效果檢測，經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn)，無交叉反應(yīng)，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠，無試劑降解、雜菌污染等問題。該細(xì)胞株是通過猿猴病毒40（SV-40）大T抗原慢病毒轉(zhuǎn)化原代肺成纖維細(xì)胞獲得的永生化細(xì)胞株，保留肺成纖維細(xì)胞的典型特性，同時具備無限傳代能力，核心特性是表達(dá)肺成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物（如波形蛋白Vimentin、α-平滑肌肌動蛋白α-SMA），可分泌纖維化相關(guān)因子，參與肺組織修復(fù)、纖維化進(jìn)程調(diào)控，廣泛應(yīng)用于肺纖維化發(fā)病機(jī)制研究、呼吸系統(tǒng)疾病研究、抗纖維化藥物篩選等領(lǐng)域，是評估肺成纖維細(xì)胞功能、纖維化程度及藥物干預(yù)效果的重要研究模型，可用于驗(yàn)證抗纖維化藥物對成纖維細(xì)胞增殖的抑制作用研究。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測快速，可精準(zhǔn)定量相關(guān)指標(biāo)含量，廣泛應(yīng)用于呼吸學(xué)科研、免疫學(xué)科研、藥物研發(fā)、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域，是臨床、科研領(lǐng)域的核心肺成纖維細(xì)胞相關(guān)檢測工具。

檢測原理

本試劑盒的核心檢測原理，基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），聚焦相關(guān)細(xì)胞檢測指標(biāo)（肺成纖維細(xì)胞標(biāo)志物、纖維化因子、增殖蛋白、信號通路分子等）的抗原抗體特異性結(jié)合特性，結(jié)合肺成纖維細(xì)胞功能檢測的精準(zhǔn)需求設(shè)計：試劑盒預(yù)先將目標(biāo)檢測指標(biāo)（如Vimentin、α-SMA、纖維化相關(guān)因子）特異性抗體包被于酶標(biāo)板上，加入待檢測樣本（相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液等）后，樣本中的目標(biāo)指標(biāo)會與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、肺成纖維細(xì)胞碎片、無關(guān)細(xì)胞因子及其他肺組織相關(guān)蛋白后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗，與復(fù)合物特異性結(jié)合，形成“包被抗體-目標(biāo)指標(biāo)-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu)；再加入底物液（TMB），HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與樣本中目標(biāo)指標(biāo)的含量呈正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），對照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出樣本中目標(biāo)指標(biāo)的具體含量。檢測流程規(guī)范：樣本采集后需及時處理（相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清離心分離、細(xì)胞裂解液制備），按照試劑盒說明書稀釋樣本；酶標(biāo)板平衡至室溫后，依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對照，37℃孵育30分鐘；洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗，37℃孵育20分鐘；再次洗滌后加入底物液，37℃避光孵育15分鐘；加入終止液終止反應(yīng)，10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測定OD值，計算檢測結(jié)果。

產(chǎn)品特點(diǎn)

本產(chǎn)品針對相關(guān)細(xì)胞指標(biāo)檢測需求優(yōu)化制備，核心特點(diǎn)如下：

1. 特異性強(qiáng)：采用高特異性目標(biāo)指標(biāo)（肺成纖維細(xì)胞標(biāo)志物Vimentin、α-SMA、纖維化因子等）單克隆抗體，可特異性結(jié)合樣本中的目標(biāo)分子，不與正常原代肺成纖維細(xì)胞雜蛋白、其他細(xì)胞系蛋白及無關(guān)因子發(fā)生交叉反應(yīng)，檢測特異性＞99%，確保檢測結(jié)果精準(zhǔn)，有效規(guī)避肺成纖維細(xì)胞相關(guān)檢測中的干擾因素，同時可有效區(qū)分肺成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物的假陽性與真實(shí)表達(dá)水平；

2. 質(zhì)控嚴(yán)格：每批次試劑盒均通過靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測，附完整QC報告，確保批內(nèi)變異系數(shù)（CV）＜8%、批間變異系數(shù)（CV）＜10%，檢測靈敏度可達(dá)0.1ng/mL，符合科研標(biāo)準(zhǔn)，可精準(zhǔn)監(jiān)測相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)指標(biāo)的微量變化，助力藥物干預(yù)效果及肺纖維化調(diào)控效果評估；

3. 操作便捷：試劑盒含全套檢測試劑（包被酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等），無需額外配制核心試劑，步驟簡單，全程可在2.5小時內(nèi)完成，適配常規(guī)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室操作，新手易上手；

4. 樣本兼容廣：可適配相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞接種后動物血清/肺組織勻漿等核心樣本類型，樣本用量少（僅需50μL/孔），無需復(fù)雜預(yù)處理，僅需簡單離心、稀釋即可檢測，適配肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)、藥物篩選、肺纖維化機(jī)制研究等多場景樣本；

5. 適配場景廣：可用于相關(guān)細(xì)胞增殖活性監(jiān)測、纖維化程度評估、肺成纖維細(xì)胞標(biāo)志物及信號通路相關(guān)分子表達(dá)檢測，肺纖維化發(fā)病機(jī)制、呼吸系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制研究，抗纖維化藥物、呼吸系統(tǒng)藥物的篩選與效果評估，以及呼吸學(xué)科研、免疫學(xué)科研、藥物研發(fā)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測。

適用樣本類型

本試劑盒適配相關(guān)細(xì)胞樣本的體外檢測與科研實(shí)驗(yàn)，適用樣本類型明確：相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本（對數(shù)期細(xì)胞培養(yǎng)上清，離心去除細(xì)胞碎片）、細(xì)胞裂解液樣本（無菌收集細(xì)胞后裂解，離心取上清）、細(xì)胞接種后動物血清樣本（靜脈采血，離心分離，避免溶血）、肺組織勻漿樣本（肺組織破碎后離心取上清）；實(shí)驗(yàn)場景涵蓋相關(guān)細(xì)胞增殖、纖維化程度監(jiān)測，肺成纖維細(xì)胞標(biāo)志物及信號通路相關(guān)分子表達(dá)檢測，肺纖維化發(fā)病機(jī)制、呼吸系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制研究，相關(guān)藥物篩選與效果評估，以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測。推薦檢測體系：使用試劑盒配套酶標(biāo)板，酶標(biāo)儀（波長450nm），按照說明書步驟操作；樣本稀釋比例為1:10（細(xì)胞裂解液、肺組織勻漿可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整），標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，參考區(qū)間為0.2~1.3ng/mL（具體以說明書為準(zhǔn)）。（具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書，該細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，培養(yǎng)需遵循貼壁細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)范，采用成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基，接種密度不低于50萬個/mL，復(fù)蘇后需給予一定恢復(fù)期，定期觀察細(xì)胞形態(tài)、增殖狀態(tài)及纖維化相關(guān)表型，避免密度過低導(dǎo)致不增殖，維持細(xì)胞貼壁狀態(tài)避免脫落影響檢測結(jié)果）

儲存與注意事項(xiàng)

1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲存，嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置，避免溫度波動導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開封后，密封冷藏保存，1個月內(nèi)用完，目標(biāo)指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融，防止其蛋白結(jié)構(gòu)破壞，底物液需避光保存；

3. 樣本采集后及時處理，相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液冷藏24小時內(nèi)完成檢測，動物血清、肺組織勻漿冷藏或-20℃短期保存，48小時內(nèi)完成檢測，避免樣本變質(zhì)、目標(biāo)指標(biāo)降解，細(xì)胞樣本需新鮮采集，避免細(xì)胞活力下降、纖維化表型異常影響檢測結(jié)果；

4. 操作時嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范，佩戴防護(hù)用品，避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜；檢測過程中控制孵育溫度與時間，洗滌充分，避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差；

5. 底物液具有潛在刺激性，終止液為酸性溶液，操作時需謹(jǐn)慎，避免接觸衣物與皮膚，檢測完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板；

6. 相關(guān)細(xì)胞樣本需無菌采集與處理，細(xì)胞裂解液需充分裂解細(xì)胞，離心去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì)后再進(jìn)行檢測，避免雜質(zhì)干擾檢測結(jié)果；培養(yǎng)上清需在細(xì)胞對數(shù)期采集，避免細(xì)胞凋亡釋放的蛋白酶導(dǎo)致目標(biāo)指標(biāo)降解，同時避免培養(yǎng)體系中血清濃度過高影響檢測準(zhǔn)確性，藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)中需避免藥物本身干擾檢測結(jié)果，纖維化誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中需注意樣本采集時機(jī)。