EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞
EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞,是通過EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)特異性感染人外周血B淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)其發(fā)生永生化轉(zhuǎn)化形成的淋巴母細(xì)胞系,是科研領(lǐng)域常用的標(biāo)準(zhǔn)化實驗材料。該細(xì)胞系核心優(yōu)勢在于可在體外長期穩(wěn)定培養(yǎng),同時保留原代B淋巴細(xì)胞的部分免疫表型與生物學(xué)功能,攜帶EBV基因組并可長期潛伏表達(dá)相關(guān)抗原,生物安全等級為BSL-2。產(chǎn)品經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)量鑒定,無細(xì)菌、真菌、支原體及無關(guān)病毒污染,細(xì)胞活力高、代次低,生物學(xué)特性穩(wěn)定,可廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、病毒學(xué)、腫瘤學(xué)、人類遺傳學(xué)等多個科研領(lǐng)域,為相關(guān)實驗研究提供可靠的體外細(xì)胞模型支撐,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)及各級醫(yī)院科研部門的實驗需求。
檢測原理
該細(xì)胞的核心檢測的核心是EBV感染有效性驗證及細(xì)胞純度、活性鑒定,結(jié)合細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)檢測方法,確保細(xì)胞系的真實性與穩(wěn)定性,具體原理如下:一是EBV感染驗證,采用免疫熒光法或Western Blot法,檢測細(xì)胞內(nèi)EBV相關(guān)抗原(如EBNA、VCA)的表達(dá),或通過PCR技術(shù)檢測EBV基因組特異性片段,確認(rèn)細(xì)胞已成功被EBV感染并實現(xiàn)永生化;二是細(xì)胞活性檢測,采用臺盼藍(lán)染色法,利用活細(xì)胞細(xì)胞膜完整、不被臺盼藍(lán)染色,死細(xì)胞細(xì)胞膜破損、被染成藍(lán)色的特性,計數(shù)活細(xì)胞比例,評估細(xì)胞活性;三是細(xì)胞純度檢測,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面CD21(EBV受體)、CD19(B淋巴細(xì)胞特異性標(biāo)志物)的表達(dá),排除雜細(xì)胞污染,確保細(xì)胞系純度;四是污染檢測,采用微生物培養(yǎng)法檢測細(xì)菌、真菌污染,PCR法檢測支原體污染,確保細(xì)胞無外源污染,保障實驗數(shù)據(jù)的可靠性。
產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品針對科研實驗需求優(yōu)化制備,兼具穩(wěn)定性、特異性與實用性,核心特點如下:1. 永生化特性突出,可在體外長期穩(wěn)定培養(yǎng),倍增時間約2-3天,無需頻繁分離原代細(xì)胞,大幅降低實驗人力與時間成本;2. 生物學(xué)特性穩(wěn)定,經(jīng)多代傳代后仍能保留B淋巴細(xì)胞部分免疫功能及EBV潛伏感染狀態(tài),染色體核型保持人類正常二倍體,無明顯變異,保障實驗數(shù)據(jù)的一致性;3. 特異性強,僅由EBV感染人外周血B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化形成,可特異性表達(dá)EBV相關(guān)抗原,部分細(xì)胞系(如B95-8)可釋放高滴度EBV,適配EBV相關(guān)專項研究;4. 細(xì)胞活力高,產(chǎn)品出廠前經(jīng)嚴(yán)格篩選,細(xì)胞活力≥95%,代次控制在5代以內(nèi),復(fù)蘇后存活率高,可快速適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境;5. 無外源污染,經(jīng)嚴(yán)格QC檢測,確保無細(xì)菌、真菌、支原體及無關(guān)病毒污染,提供完整檢測報告;6. 適配性廣,可兼容RPMI 1640、IMDM等多種培養(yǎng)基,支持懸浮培養(yǎng),部分細(xì)胞可適應(yīng)缺氧培養(yǎng)條件,適配多種科研實驗場景;7. 實用性強,可直接用于實驗,無需額外進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作,廠家提供全程技術(shù)指導(dǎo),降低實驗門檻。
適用樣本類型
本產(chǎn)品為該細(xì)胞系成品,適配各類科研實驗場景,可直接用于相關(guān)實驗操作,其對應(yīng)的原代樣本來源及成品細(xì)胞適用的實驗樣本形式如下:原代樣本來源為健康人或特定人群外周血B淋巴細(xì)胞,經(jīng)EBV轉(zhuǎn)化后形成成品細(xì)胞系;成品細(xì)胞可直接作為實驗樣本,用于體外培養(yǎng)、藥物處理、分子檢測、免疫實驗等,適配的實驗樣本形式包括細(xì)胞懸液、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞爬片等,可滿足不同實驗檢測需求。
備注:(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書)
儲存與注意事項
### (一)儲存條件
1. 復(fù)蘇狀態(tài)細(xì)胞:收到細(xì)胞后,立即置于37℃、5%CO?恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24小時內(nèi)完成換液,短期儲存(1-7天)可維持該培養(yǎng)條件,避免頻繁移動培養(yǎng)瓶;2. 凍存狀態(tài)細(xì)胞:采用液氮(-196℃)長期儲存,凍存液配方為30%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+60%胎牛血清+10%DMSO,分裝至凍存管后經(jīng)程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮)處理,避免反復(fù)凍融;3. 未開封配套試劑(如凍存液、復(fù)蘇輔助試劑):2-8℃冷藏避光保存,有效期內(nèi)使用,嚴(yán)禁冷凍。
### (二)注意事項
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用,不可用于人類或動物臨床診斷、治療,非藥用、非食用,操作需在BSL-2生物安全實驗室進(jìn)行,嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范及血液制品處理預(yù)防措施;2. 細(xì)胞培養(yǎng)過程中,實驗器材需徹di滅菌,移液器吸頭一次性使用,避免交叉污染,不可擅自更換培養(yǎng)基體系或血清比例,定期觀察細(xì)胞狀態(tài),及時換液、傳代;3. 收到細(xì)胞后需立即檢查,若出現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、漏液、培養(yǎng)液渾濁或細(xì)胞活力異常,及時與廠家聯(lián)系反饋;4. 細(xì)胞復(fù)蘇時需快速解凍(37℃水浴5-10分鐘),避免DMSO損傷細(xì)胞,復(fù)蘇后及時離心洗滌,培養(yǎng)過夜后檢查細(xì)胞狀態(tài);5. 部分細(xì)胞系(如B95-8)可能攜帶松鼠猴逆轉(zhuǎn)錄病毒(SMRV-B95-8),操作時需加強防護(hù),廢棄細(xì)胞及培養(yǎng)廢液按生物安全規(guī)范妥善處理;6. 定期對細(xì)胞進(jìn)行鑒定,包括EBV感染狀態(tài)、細(xì)胞純度及污染情況,防止細(xì)胞變異或污染;7. 凍存細(xì)胞復(fù)蘇后建議盡快使用,未使用的細(xì)胞需按規(guī)范凍存,避免反復(fù)凍融影響細(xì)胞活性。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。