ASP2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞（FC33）由293細(xì)胞轉(zhuǎn)染ASP2基因構(gòu)建，上皮樣、貼壁生長(zhǎng)。該模型穩(wěn)定表達(dá)ASP2蛋白，用于阿爾茨海默病中β-淀粉樣蛋白生成機(jī)制研究及藥物篩選。

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ASP2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞

ASP2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞核心產(chǎn)品為構(gòu)建成功的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化細(xì)胞株，可提供不同基因修飾類型（ASP2過(guò)表達(dá)、ASP2干擾）的細(xì)胞系，配套提供細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明書、細(xì)胞凍存液、復(fù)蘇液及質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告（含細(xì)胞純度、ASP2基因表達(dá)效率、支原體檢測(cè)等），同時(shí)提供細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持及定制化基因修飾服務(wù)。該細(xì)胞以人胚胎腎細(xì)胞為親本，采用慢病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染等成熟基因編輯技術(shù)，將ASP2基因定向?qū)胗H本細(xì)胞，經(jīng)嘌呤霉素抗性篩選、Western Blot、Real-time PCR等方法驗(yàn)證，確保ASP2基因穩(wěn)定表達(dá)（過(guò)表達(dá)細(xì)胞系A(chǔ)SP2蛋白表達(dá)水平顯著升高，干擾細(xì)胞系表達(dá)水平顯著下調(diào)），細(xì)胞純度≥98%，無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌污染。該細(xì)胞適配常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)條件，可穩(wěn)定傳代20代以上，生物學(xué)特性穩(wěn)定，保留其固有生理功能及ASP2基因調(diào)控特性，廣泛應(yīng)用于急性腎損傷、腎細(xì)胞癌等腎臟疾病發(fā)病機(jī)制研究、ASP2基因?qū)?xì)胞凋亡與自噬的調(diào)控研究、腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)機(jī)制研究及相關(guān)靶向藥物篩選等科研場(chǎng)景，為腎臟病學(xué)、分子生物學(xué)、腫瘤學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的科研探索、藥物研發(fā)提供核心細(xì)胞模型，適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及各級(jí)醫(yī)院腎內(nèi)科、腫瘤科科研部門。

構(gòu)建原理

該細(xì)胞的構(gòu)建核心基于基因編輯技術(shù)，結(jié)合人胚胎腎細(xì)胞的生物學(xué)特性及ASP2基因的功能特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)ASP2基因的精準(zhǔn)導(dǎo)入與穩(wěn)定表達(dá)，具體核心原理分為兩種常見(jiàn)類型，適配不同科研需求：一是ASP2過(guò)表達(dá)細(xì)胞構(gòu)建原理，將ASP2基因片段克隆至慢病毒表達(dá)載體，與輔助質(zhì)粒（psPAX2、pMD2.G等）共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，收集病毒上清后感染人胚胎腎親本細(xì)胞，通過(guò)嘌呤霉素抗性篩選獲得穩(wěn)定過(guò)表達(dá)ASP2基因的轉(zhuǎn)化細(xì)胞株，用于研究ASP2基因的促凋亡、抑癌及調(diào)控自噬的功能，探究其在腎臟疾病中的作用機(jī)制；二是ASP2干擾細(xì)胞構(gòu)建原理，構(gòu)建靶向ASP2基因的shRNA慢病毒表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染人胚胎腎親本細(xì)胞后篩選穩(wěn)定細(xì)胞株，通過(guò)Western Blot和Real-time PCR檢測(cè)驗(yàn)證ASP2基因表達(dá)水平顯著下調(diào)，用于研究ASP2基因沉默后對(duì)腎細(xì)胞增殖、凋亡、自噬及腫瘤轉(zhuǎn)移能力的影響。此外，所有構(gòu)建的轉(zhuǎn)化細(xì)胞系均需經(jīng)過(guò)支原體、細(xì)菌等污染檢測(cè)及細(xì)胞活力、傳代能力驗(yàn)證，確保細(xì)胞系的穩(wěn)定性和可靠性，為后續(xù)科研實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)質(zhì)細(xì)胞模型，同時(shí)可通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)體系，模擬體內(nèi)腎臟微環(huán)境，提升細(xì)胞體外培養(yǎng)的穩(wěn)定性。

產(chǎn)品特點(diǎn)

該細(xì)胞以“純度高、穩(wěn)定性好、基因表達(dá)精準(zhǔn)、適配性廣"為核心，貼合腎臟疾病、腫瘤相關(guān)研究的實(shí)際科研需求，核心特點(diǎn)突出，匹配科研實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞模型的核心訴求。一是基因修飾精準(zhǔn)高效，采用慢病毒轉(zhuǎn)染等成熟基因編輯技術(shù)，經(jīng)多輪驗(yàn)證確保ASP2基因穩(wěn)定表達(dá)或干擾，無(wú)明顯脫靶效應(yīng)，能精準(zhǔn)模擬腎臟疾病、腫瘤中ASP2基因異常調(diào)控的病理狀態(tài)，助力相關(guān)機(jī)制研究；二是細(xì)胞純度高、無(wú)污染，細(xì)胞純度≥98%，經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè)無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及雜細(xì)胞污染，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，避免雜細(xì)胞及污染對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾；三是生物學(xué)特性穩(wěn)定，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，可穩(wěn)定傳代20代以上，傳代過(guò)程中ASP2基因表達(dá)特性不丟失，細(xì)胞增殖、凋亡、自噬等生物學(xué)行為穩(wěn)定，符合科研實(shí)驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)可重復(fù)性的核心要求；四是功能關(guān)聯(lián)性強(qiáng)，保留人胚胎腎細(xì)胞的固有特性，同時(shí)具備ASP2基因調(diào)控相關(guān)功能，可用于研究ASP2對(duì)細(xì)胞凋亡、自噬的調(diào)控機(jī)制，以及與急性腎損傷、腎細(xì)胞癌、腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)聯(lián)，適配多領(lǐng)域科研需求；五是適配性強(qiáng)，可適配體外常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)、MTT增殖實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、Western blotting檢測(cè)、免疫熒光染色、流式細(xì)胞術(shù)等多種實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景，同時(shí)可用于裸鼠異種移植體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，助力體內(nèi)外協(xié)同研究；六是操作便捷，提供完整的細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、凍存說(shuō)明書，細(xì)胞復(fù)蘇成活率高（≥90%），無(wú)需復(fù)雜實(shí)驗(yàn)設(shè)備，常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)條件即可滿足生長(zhǎng)需求，適配各類實(shí)驗(yàn)室操作，同時(shí)提供基因表達(dá)驗(yàn)證、細(xì)胞培養(yǎng)等專屬技術(shù)指導(dǎo)。

適用實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景

該細(xì)胞專為腎臟疾病、腫瘤相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，適配多種體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景，核心應(yīng)用包括：一是腎臟疾病發(fā)病機(jī)制研究，探究該細(xì)胞中ASP2基因表達(dá)異常與急性腎損傷、腎細(xì)胞癌等疾病的關(guān)聯(lián)，明確ASP2通過(guò)調(diào)控自噬、細(xì)胞凋亡影響腎臟疾病發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制，為疾病早期預(yù)防和診斷提供理論依據(jù)；二是ASP2基因功能研究，通過(guò)該細(xì)胞開(kāi)展ASP2基因過(guò)表達(dá)或沉默實(shí)驗(yàn)，探究其對(duì)細(xì)胞凋亡、自噬的調(diào)控作用，以及與AMPK-mTOR、Atg5-Atg12等相關(guān)信號(hào)通路的關(guān)聯(lián)，明確其在細(xì)胞生理、病理過(guò)程中的核心作用；三是腫瘤相關(guān)機(jī)制研究，利用該細(xì)胞探究ASP2基因?qū)δ[瘤轉(zhuǎn)移的調(diào)控作用，分析其與E-鈣粘蛋白、β-連環(huán)蛋白及VEGF等相關(guān)蛋白的關(guān)聯(lián)，為腫瘤靶向治療研究提供支撐；四是藥物篩選與藥效評(píng)估，將該細(xì)胞用于針對(duì)ASP2基因及相關(guān)信號(hào)通路的靶向藥物篩選，通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)等，評(píng)估藥物對(duì)該細(xì)胞增殖、凋亡、自噬的影響，為腎臟疾病、腫瘤相關(guān)藥物研發(fā)提供可靠的篩選模型；五是分子機(jī)制驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，可用于Western blotting、Real-time PCR、免疫熒光染色等實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證ASP2基因相關(guān)信號(hào)通路的調(diào)控機(jī)制，為相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制研究提供分子層面的數(shù)據(jù)支撐；六是細(xì)胞衰老相關(guān)研究，探究ASP2基因與細(xì)胞衰老的關(guān)聯(lián)，為細(xì)胞衰老相關(guān)疾病的研究提供細(xì)胞模型支撐。該細(xì)胞適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及各級(jí)醫(yī)院腎內(nèi)科、腫瘤科科研部門，助力相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)的順利開(kāi)展。

備注：（具體細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)操作方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書）

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

儲(chǔ)存方面，該細(xì)胞凍存狀態(tài)下需置于-80℃超低溫冰箱或液氮中保存，有效期為12個(gè)月，凍存時(shí)需使用含5-10%DMSO的配套凍存液，采用梯度降溫法凍存（-1~-2℃/min降溫至-25℃以下，再以-5~-10℃/min降溫至-100℃后浸入液氮），避免細(xì)胞損傷；復(fù)蘇時(shí)需快速解凍（37℃水浴1-2分鐘），解凍后立即用70%酒精消毒凍存管，避免進(jìn)水污染，復(fù)蘇后需立即接種至培養(yǎng)瓶，置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，復(fù)蘇后24小時(shí)內(nèi)避免更換培養(yǎng)基，確保細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境；常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)下，細(xì)胞需置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中，使用含10%胎牛血清的DMEM或RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，定期更換培養(yǎng)基（每2-3天一次），確保細(xì)胞正常生長(zhǎng)。注意事項(xiàng)包括：產(chǎn)品僅供科研使用，不用于臨床治療診斷；細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需快速解凍，避免反復(fù)凍融，解凍后及時(shí)接種，防止細(xì)胞活力下降，凍存管取出時(shí)需注意防護(hù)，避免凍傷；培養(yǎng)過(guò)程中需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則，禁止共用培養(yǎng)耗材，避免細(xì)胞污染，若發(fā)生污染切勿進(jìn)行半量換液；細(xì)胞傳代時(shí)需控制消化時(shí)間，避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷，傳代比例建議為1:3-1:5，確保細(xì)胞生長(zhǎng)密度適宜；檢測(cè)過(guò)程中（如Western blotting、Real-time PCR），需嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范，確保ASP2基因表達(dá)及相關(guān)分子檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確；過(guò)期細(xì)胞及污染細(xì)胞嚴(yán)禁使用，詳細(xì)安全信息請(qǐng)參照產(chǎn)品SDS文件；運(yùn)輸過(guò)程中需采用干冰運(yùn)輸，避免高溫、劇烈震蕩，確保細(xì)胞活力，運(yùn)輸后需及時(shí)復(fù)蘇或轉(zhuǎn)移至對(duì)應(yīng)儲(chǔ)存環(huán)境。