EB病毒感染的人外周淋巴細(xì)胞
EB病毒感染的人外周淋巴細(xì)胞,是通過(guò)EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)特異性感染人外周血淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)其發(fā)生永生化轉(zhuǎn)化形成的淋巴母細(xì)胞系,是科研領(lǐng)域常用的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)材料。該細(xì)胞系核心優(yōu)勢(shì)在于可在體外長(zhǎng)期穩(wěn)定培養(yǎng),同時(shí)完整保留人外周淋巴細(xì)胞的部分免疫表型與生物學(xué)功能,攜帶EBV基因組并可長(zhǎng)期潛伏表達(dá)相關(guān)抗原,生物安全等級(jí)為BSL-2。該細(xì)胞系經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)量鑒定,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及無(wú)關(guān)病毒污染,細(xì)胞活力高、代次低,生物學(xué)特性穩(wěn)定,可廣泛應(yīng)用于人類遺傳學(xué)、免疫學(xué)、病毒學(xué)、腫瘤學(xué)等多個(gè)科研領(lǐng)域,為相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究提供可靠的體外細(xì)胞模型支撐,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)及各級(jí)醫(yī)院科研部門的實(shí)驗(yàn)需求。
檢測(cè)原理
本產(chǎn)品的核心檢測(cè)是EBV感染有效性驗(yàn)證、細(xì)胞純度及活性鑒定,結(jié)合細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)檢測(cè)方法,確保細(xì)胞系的真實(shí)性與穩(wěn)定性,具體原理如下:一是EBV感染驗(yàn)證,采用免疫熒光法或Western Blot法,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)EBV相關(guān)抗原(如EBNA、VCA)的表達(dá),或通過(guò)PCR技術(shù)檢測(cè)EBV基因組特異性片段,確認(rèn)細(xì)胞已成功被EBV感染并實(shí)現(xiàn)永生化;二是細(xì)胞活性檢測(cè),采用臺(tái)盼藍(lán)染色法,利用活細(xì)胞細(xì)胞膜完整、不被臺(tái)盼藍(lán)染色,死細(xì)胞細(xì)胞膜破損、被染成藍(lán)色的特性,計(jì)數(shù)活細(xì)胞比例,評(píng)估細(xì)胞活性;三是細(xì)胞純度檢測(cè),通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面CD21(EBV受體)、CD19(B淋巴細(xì)胞特異性標(biāo)志物)的表達(dá),排除雜細(xì)胞污染,確保細(xì)胞系純度;四是污染檢測(cè),采用微生物培養(yǎng)法檢測(cè)細(xì)菌、真菌污染,PCR法檢測(cè)支原體污染,確保細(xì)胞無(wú)外源污染,保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。
產(chǎn)品特點(diǎn)
本產(chǎn)品針對(duì)科研實(shí)驗(yàn)需求優(yōu)化制備,兼具穩(wěn)定性、特異性與實(shí)用性,核心特點(diǎn)如下:1. 永生化特性突出,可在體外長(zhǎng)期穩(wěn)定培養(yǎng),倍增時(shí)間約2-3天,無(wú)需頻繁分離原代人外周血淋巴細(xì)胞,大幅降低實(shí)驗(yàn)人力與時(shí)間成本,同時(shí)避免原代細(xì)胞來(lái)源有限的問(wèn)題;2. 生物學(xué)特性穩(wěn)定,經(jīng)多代傳代后仍能保留人外周淋巴細(xì)胞部分免疫功能及EBV潛伏感染狀態(tài),染色體核型保持人類正常二倍體,無(wú)明顯變異,保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的一致性;3. 特異性強(qiáng),僅由EBV感染人外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化形成,可特異性表達(dá)EBV相關(guān)抗原,部分細(xì)胞系可釋放高滴度EBV,適配EBV相關(guān)專項(xiàng)研究及人EBV感染機(jī)制研究;4. 細(xì)胞活力高,產(chǎn)品出廠前經(jīng)嚴(yán)格篩選,細(xì)胞活力≥95%,代次控制在5代以內(nèi),復(fù)蘇后存活率高,可快速適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境;5. 無(wú)外源污染,經(jīng)嚴(yán)格QC檢測(cè),確保無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及無(wú)關(guān)病毒污染,提供完整檢測(cè)報(bào)告;6. 適配性廣,可兼容RPMI 1640、IMDM等多種培養(yǎng)基,支持懸浮培養(yǎng),部分細(xì)胞可適應(yīng)缺氧培養(yǎng)條件,適配免疫、病毒、遺傳等多種科研實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景;7. 實(shí)用性強(qiáng),可直接用于實(shí)驗(yàn),無(wú)需額外進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作,廠家提供全程技術(shù)指導(dǎo),降低實(shí)驗(yàn)門檻。
適用樣本類型
本產(chǎn)品為成品,適配各類科研實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,可直接用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作,其對(duì)應(yīng)的原代樣本來(lái)源及成品細(xì)胞適用的實(shí)驗(yàn)樣本形式如下:原代樣本來(lái)源為健康人群外周血淋巴細(xì)胞,經(jīng)EBV轉(zhuǎn)化(轉(zhuǎn)化過(guò)程中加入環(huán)孢mei素A抑制T淋巴細(xì)胞,提升轉(zhuǎn)化效率)后形成成品細(xì)胞系,完整保留人外周淋巴細(xì)胞相關(guān)生物學(xué)特性;成品細(xì)胞可直接作為實(shí)驗(yàn)樣本,用于體外培養(yǎng)、藥物處理、分子檢測(cè)、免疫實(shí)驗(yàn)等,適配的實(shí)驗(yàn)樣本形式包括細(xì)胞懸液、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞爬片等,可滿足EBV感染機(jī)制、免疫功能、藥物篩選等不同實(shí)驗(yàn)檢測(cè)需求。
備注:(具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū))
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
(一)儲(chǔ)存條件
1. 復(fù)蘇狀態(tài)細(xì)胞:收到細(xì)胞后,立即置于37℃、5%CO?恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24小時(shí)內(nèi)完成換液,短期儲(chǔ)存(1-7天)可維持該培養(yǎng)條件,避免頻繁移動(dòng)培養(yǎng)瓶;2. 凍存狀態(tài)細(xì)胞:采用液氮(-196℃)長(zhǎng)期儲(chǔ)存,凍存液配方為30%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+60%胎牛血清+10%DMSO,分裝至凍存管后經(jīng)程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮)處理,避免反復(fù)凍融;3. 未開(kāi)封配套試劑(如凍存液、復(fù)蘇輔助試劑):2-8℃冷藏避光保存,有效期內(nèi)使用,嚴(yán)禁冷凍。
(二)注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用,不可用于人類或動(dòng)物臨床診斷、治療,非藥用、非食用,操作需在BSL-2生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范及血液制品處理預(yù)防措施;2. 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)器材需徹di滅菌,移液器吸頭一次性使用,避免交叉污染,不可擅自更換培養(yǎng)基體系或血清比例,定期觀察細(xì)胞狀態(tài),及時(shí)換液、傳代,確保細(xì)胞生物學(xué)特性穩(wěn)定;3. 收到細(xì)胞后需立即檢查,若出現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、漏液、培養(yǎng)液渾濁或細(xì)胞活力異常,及時(shí)與廠家聯(lián)系反饋;4. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需快速解凍(37℃水浴5-10分鐘),避免DMSO損傷細(xì)胞,復(fù)蘇后及時(shí)離心洗滌,培養(yǎng)過(guò)夜后檢查細(xì)胞狀態(tài);5. 部分細(xì)胞系(如B95-8衍生系)可能攜帶松鼠猴逆轉(zhuǎn)錄病毒(SMRV-B95-8),操作時(shí)需加強(qiáng)防護(hù),廢棄細(xì)胞及培養(yǎng)廢液按生物安全規(guī)范妥善處理;6. 定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定,包括EBV感染狀態(tài)、細(xì)胞純度及污染情況,防止細(xì)胞變異或污染;7. 凍存細(xì)胞復(fù)蘇后建議盡快使用,未使用的細(xì)胞需按規(guī)范凍存,避免反復(fù)凍融影響細(xì)胞活性及生物學(xué)特性穩(wěn)定性。
訂購(gòu)信息
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